小蔓学姐:
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Hello 大家好呀,我是小蔓学姐,暑假已经到来,大家如今复习的怎么样呢,上次学姐给大家带来了细胞生物学第 1、2、3、4 章的重点内容,并且都是以标准的答题模式来作答的,那今天学姐给大家带来细胞生物学 5、6 章的重点内容,相信大家看完一定会有所帮助,下面我们就开始吧!
首先是 5、6 章名词部分,名词部分有同学问是不是只需要把定义写出来呢,其实只写这个是不够的,大家需要把这个名词的一些其他特征也写出来,至少写出三点——比如特点、意义、过程、对比、举例等等。
细胞质基质(cytoplasmic matrix):
在真核细胞的细胞质中,除去可分辨的细胞器外的胶状物质,占据着细胞膜内、细胞核外的细胞内空间,称细胞质基质。细胞质基质是高度有序的体系,主要成分包括水和溶于其中的离子以及以可溶性蛋白质为主的大分子,是某些蛋白质合成和脂肪酸合成的场所。
微粒体(microsome):
是在细胞匀浆和超速离心过程中,由破碎的内质网形成的近似球形的囊泡结构,它包含内质网膜与核糖体两种基本组分。这是形态上的人工产物,在体外实验中,微粒体仍具有蛋白质合成、蛋白质的糖基化和脂质合成等内质网的基本功能,在生化与功能研究中,常常把微粒体和内质网等同看待。
内质网应激(endoplasmic reticulum stress, ERS):
内质网生理功能发生紊乱,未折叠及错误折叠的蛋白质在内质网腔内超量积累时,引发内质网应激反应,来应对条件的变化和恢复内质网良好的蛋白质折叠环境。ERS 是体内的一种自我保护的机制,也是一套完整的质量监控机制,帮助内质网中蛋白质的折叠与修饰。
高尔基体(Golgibody):
高尔基体是真核细胞中普遍存在的一种细胞器,通常由 4-8 个排列较为整齐的弓形或半球形扁平膜囊堆叠形成高尔基体的极性主体结构,膜囊周围又有许多大小不等的囊泡结构,他们是是高度动态的,通过膜泡转运实现大分子在各部分间的有序转移。高尔基体主要负责蛋白质的加工、分选、运输以及蛋白聚糖、植物细胞壁中多糖的合成。
泛素(ubiquitin):
是由 76 个氨基酸组成的小分子球蛋白,具有热稳定性,普遍存在于真核细胞中且序列高度保守,具有多种生物学功能,在泛素依赖性的蛋白质降解途径中,通过将多个泛素分子与靶蛋白共价结合,形成具有泛素化标签的泛素化靶蛋白,而后由蛋白酶体识别并降解。
后翻译转运(Post translation translocation):
游离核糖体上合成的蛋白质必须等蛋白质完全合成并释放到胞质溶胶后才能被转运,所以将这种转运方式称为后翻译转运。通过这种方式转运的蛋白质包括线粒体、叶绿体和细胞核的部分蛋白,以及过氧化物酶体的全部蛋白等。在游离核糖体上合成的蛋白质中有相当一部分直接存在于胞质溶胶中, 包括细胞骨架蛋白、各种反应体系的酶或蛋白等。
然后就到了我们的简答/论述部分啦,这部分大家在写的时候记得写的完整一点,不要漏点,因为这边改卷是按点给分的。
1、蛋白质的泛素化蛋白酶体降解方式以及如何抑制这种降解?
答:
泛素:是由 76 个氨基酸组成的小分子球蛋白,具有热稳定性,普遍存在于真核细胞中且序列高度保守,具有多种生物学功能,在泛素依赖性的蛋白质降解途径中,通过将多个泛素分子与靶蛋白共价结合,形成具有泛素化标签的泛素化靶蛋白,而后由蛋白酶体识别并降解。
蛋白酶体:是细胞内降解蛋白质的大分子复合体,呈中空桶状结构,中间是 20S 催化核心,两端各有一个 19s 帽,起识别和调节作用在蛋白质降解过程中,由 19S 帽识别泛素化标签,并利用 ATP 水解提供的能量驱动泛素分子的切除和靶蛋白去折叠,而后去折叠的蛋白质转移到 20S 核心腔内被降解。
过程:
①泛素活化酶(E1)通过形成酰基-腺苷酸中介物使泛素分子 C 端被激活,该反应需要 ATP;
②通过交酯化作用,泛素结合酶(E2)取代 E1,通过半胱氨酸残基与泛素结合;
③异肽键形成,在泛素连接酶(E3)催化下,与 E2 结合的泛素羧基和靶蛋白赖氨酸侧链的氨基之间形成异肽键;
重复上述步骤,形成具有寡聚泛素链的泛素化靶蛋白;
④泛素化标签被蛋白酶体 19S 帽识别,并利用 ATP 水解提供的能量驱动泛素分子的切除和靶蛋白解折叠;
⑤去折叠的蛋白质转移至蛋白酶体核心腔内被降解。
抑制方式:
1、使用泛素-蛋白酶体降解途径的抑制剂 MG132 抑制其降解,MG132 能够与蛋白酶结合,形成稳定的复合物,从而阻碍蛋白酶与其底物的结合和降解。 这种抑制作用能够使得细胞内的蛋白质得以稳定,延长其在细胞内的寿命;
2、其他方式:将参与泛素-蛋白酶体降解途径的关键酶基因敲除,从而阻止蛋白降解。
2、真核细胞中分泌性蛋白合成和共翻译转运途径过程。
答:
共翻译转运:是指分泌性蛋白在信号肽引导下边翻译边跨膜向 rER 腔内转运的过程,最终新生肽链转入 rER 腔内或定位在 ER 膜上,经转运膜泡至 Golg;加工包装再分选至溶酶体、细胞质膜或分泌到细胞外,或驻留在内质网、高尔基体中分泌性蛋白合成和共翻译转运过程:
①在细胞质基质的游离 Rib 上起始肽链合成;
②肽链延伸至 80 个 aa 左右时,N 端的信号肽序列暴露出 Rib,并与细胞质中的信号识别颗粒SRP 结合,肽链延伸暂停;
③SRP 与内质网膜上的停泊蛋面结合,Rib/肽链与 ER 膜上移位子结合,之后 SRP 脱离返回胞质重复使用,肽链又开始延伸;
④环化构象的信号肽与移位子结合并使孔道打开,信号肽穿过 ER 膜并引导肽链以袢环形式进入 ER 腔;
⑤同时,腔面上的信号肽酶切除信号肽并使之快速降解,肽链延伸直至完成,释放到内质网腔,Rib 释放,移位子关闭;
(如果合成的是分泌蛋白,除了信号序列被信号肽酶切除外,全部进入内质网的腔,若是膜蛋白,则由一个或多个停止转移信号将蛋白质锚定在内质网膜上)
(膜蛋白不一定是分泌蛋白,但分泌蛋白可以是膜蛋白)

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