研究团队依托科研公共服务条件平台300kV 冷冻透射电镜(Krios G4)、200kV 冷冻透射电镜(Glacios) 等尖端设备,完成了多种功能状态下 DRT4 蛋白的样品制备、数据采集与结构解析,成功获得9 套高分辨率结构,整体分辨率均达3 Å,最优分辨率达2.22 Å。高分辨率结构清晰显示,DRT4 以六聚体形式存在,可通过蛋白 - 引物(protein-primer)介导、以无模板方式合成单链 DNA(ssDNA)。在 Apo 态与 RNase 非活性态时,合成的 ssDNA 3' 端定位于聚合口袋内;而在 RNase 活性态下,ssDNA 脱离聚合口袋并迁移至蛋白外部。高分辨结构进一步揭示:RNase 非活性态与活性态下,聚合口袋内结合的 dGTP 呈现两种截然不同的结合模式,证实 dGTP 与 ssDNA 共同驱动 DRT4 从 RNase 非活性态向活性态转变。RNase 活性态 DRT4 通过单侧三聚体旋转构象变化,形成 RNA 结合口袋,且可直接观察到口袋内结合的 RNA 电子密度。
武汉大学科研公共服务条件平台作为学校大型科研基础设施集约化管理与开放共享的核心载体,整合了300kV 冷冻透射电镜(Krios G4)、200kV 冷冻透射电镜(Glacios)、120kV 透射电镜(Talos L120C) 等一系列尖端设备,同时配备电镜制样设备及计算集群,构成完备的冷冻电镜技术体系。平台设备全面开放共享,可提供蛋白质等大分子复合物单颗粒分析、电子断层扫描、微晶电子衍射等一站式技术服务,适配结构生物学、免疫学、材料科学、医学等多学科前沿研究需求。截至目前,机组已支撑发表《Nature》《Science》《Nature Structure & Molecular Biology》《Advanced Materials》《JACS》等国际高水平期刊论文 40 余篇,产出成果学术影响力突出,为高水平科研创新提供了坚实支撑。
